1 差速離心
差速離心利用離心樣本組分中不同沉降系數(shù)粒子的沉降速度差別(如各細(xì)胞組分),經(jīng)一定速度、一定離心力及一定時(shí)間離心,先后沉降而得到分離。在此過(guò)程中樣本往往被分離為沉淀物和上清液兩部分。前提是待分離的兩種或幾種粒子的S值的差值足夠大(至少差10倍以上)才能得到較好的分離，如果兩種或幾種粒子的S值相差很小,則難得到好的分離。關(guān)鍵要精確控制好分步離心的時(shí)間和速度,時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或轉(zhuǎn)速過(guò)高會(huì)使不該沉降的顆粒也沉降下來(lái),影響分離純化效果。

2 密度梯度離心
密度梯度離心是樣本在有密度梯度的惰性介質(zhì)液中進(jìn)行離心沉降或沉降平衡,即在一定離心力作用下把粒子分配到梯度液中相應(yīng)的位置上,形成不同區(qū)帶而得到分離(0。密度梯度離心又可分為:

(1)密度梯度沉降離心或稱差速區(qū)帶離心。用于分離粒子大小、形狀各異(存在一定的S值差)而密度相近的樣本。梯度液密度<樣本組分密度,先將樣本液加在梯度液液面上,在離心力作用下粒子各自以一定的速度沉降逐漸分離在離心容器中依沉降系數(shù)大小形成由下至上的區(qū)帶。操作要領(lǐng)是需精確設(shè)定離心時(shí)間(各樣本區(qū)帶間拉開(kāi)到最大距離后即停機(jī)),降速不能過(guò)快。

(2)等密度離心。待分離樣本粒子在密度梯度液密度范圍內(nèi),離心前加樣其中呈均勻分布,在離心力的作用下,依不同粒子的浮力密度差,或向下沉降、或向上浮起,最終沿梯度移動(dòng)到與它們恰好相等的密度梯度位置上(即等密度點(diǎn))形成區(qū)帶。離心效果取決于粒子的浮力密度差,差值越大分離效果越好,與粒子的大小、形狀無(wú)關(guān),但后兩者涉及到平衡的速度、時(shí)間及區(qū)帶的寬度。離心時(shí)間一般要長(zhǎng)于差速區(qū)帶離心。